Принцип олиго синтисајзера
У областима молекуларне биологије и генетичке истраживања, способност синтезе ДНК игра пресудну улогу.Синтеза ДНК укључује вештачку производњу молекула ДНК аранжирањем нуклеотида у одређеном редоследу.Да би се то постигло, научници се ослањају на моћан алат познат као олигонуклеотид синтетизатор, такође познат као ДНК синтетизатор.
Синтетизатор олигонуклеотида је софистициран инструмент који аутоматски синтетише кратке молекуле ДНК зване олигонуклеотиди.Ови кратки видовици ДНК су обично дужине 10 до 100 нуклеотида и суштински су грађевински блокови у широком разноликој примени, укључујући реакцију ланчане полимеразе (ПЦР), генски синтеза, генетски инжењеринг и ДНК секвенцирање.
Олигонуклеотидни синтисајзери раде на принципу технике познате каоСинтеза солидне фазе.Ова метода је први пут постала нобелов лауреате доктор Марвин Царутхерс 1970-их и прецизиран је током година како би се побољшала синтеза ДНК секвенце.Синтезу олигонуклеотида врши се поступно додавање нуклеотидних остатака на 5'-терминус растућег ланца све док се не окупља жељена секвенца.Сваки додатак се назива циклусом синтезе и састоји се од четири хемијске реакције:
Корак 1: Блокирање де-блокирања (од------2. корак: Спојница ---------Корак 3: Цаппинг -----------Корак 4: Оксидација
Овај поступак се понавља за свако нуклеотид док се не добије жељена секвенца.За дуже олигонуклеотиде, овај циклус се можда мора поновити неколико пута да синтетишу целокупну секвенцу. Способност прецизности контроле сваког корака циклуса синтезе је пресудна за синтетизатор олигонуклеотида.Реагенси коришћени, попут нуклеотида и активатора, морају бити од високог квалитета како би се осигурала тачна и ефикасна синтеза.Поред тога, синтетизатори захтевају високу прецизну контролу температуре и друге услове заштите животне средине за промовисање жељених реакција спојница и спречавање нежељених реакција.
Када се олигонуклеотид у потпуности синтетише, он се типично одваја од чврстог носача и пречишћава да би се уклониле све преостале заштитне групе или нечистоће.Пречишћени олигонуклеотиди су тада спремни за низводне примене.
Напредак у технологији омогућило је развој високих протока олигонуклеотидних синтетичара који могу истовремено синтетизовати стотине или чак хиљаде олигонуклеотида.Ови инструменти користе Мицроарраи систем синтезе на бази микрорара, омогућавајући истраживачима да брзо генеришу велике олигонуклеотидне библиотеке за различите истраживачке сврхе.
Укратко, принципи који стоје иза олигонуклеотида синтетичара врте се око техника синтезе на чврстој фази, што укључује поступно додавање нуклеотида на чврсту подршку.Прецизна контрола циклуса синтезе и висококвалитетни реагенси су од суштинског значаја за тачну и ефикасну синтезу.Олиго синтетизира играју виталну улогу у истраживању ДНК, омогућавајући научницима да генеришу прилагођене олигонуклеотиде за различите примене, који доприносе напретку у биотехнологији и генетском истраживању.
Време поста: 01.08.2023